H3N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立

作     者：刘婷婷 谢芝勋 宋德贵 罗思思 谢丽基 李孟 谢志勤 邓显文 

作者机构：广西师范大学生命科学学院广西桂林541000 广西兽医研究所畜禽疫苗新技术重点实验室南宁530001 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2015年第7期

页      面：172-174页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：广西特聘专家专项(2011B020) 广西科技攻关重大专项(1222003-2-4) 广西畜禽疫苗新技术重点实验室项目(13-051-27-A-2) 

主　　题：H3N2亚型 禽流感病毒 二重RT-PCR 病毒分离 特异性 敏感性 检测技术 

摘      要：为了建立一种简便、快速检测H3N2亚型禽流感病毒的方法,试验根据Gen Bank中H3、N2亚型禽流感病毒HA和NA基因保守序列,设计并筛选出2对特异性引物,通过优化反应条件建立H3N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法。结果表明:该方法既能同时特异性扩增出H3N2亚型禽流感病毒,也可扩增出H3、N2亚型禽流感病毒,而对其他亚型和常见禽病病原体均不扩增;该方法对H3N2亚型禽流感病毒的检测下限为10 pg;用该方法对96份临床样品进行检测,结果与病毒分离鉴定结果一致。说明试验所建立的H3N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高的特点。