血吸虫肠相关循环抗原组分CAA和CCA的纯化与特异检测

作     者：钱宗立 王兆军 陆萍 

作者机构：上海第二医科大学寄生虫学教研室 荷兰莱登大学寄生虫学研究室 

出 版 物：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 (Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases)

年 卷 期：1999年第17卷第2期

页      面：65-69页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：欧共体INCO-DCSTD-3持续项目基金 中国总理专项研究基金 

主　　题：血吸虫 肠相关循环抗原 CAA Mono-Q-HPLC 

摘      要：目的：探讨血吸虫肠相关循环抗原ＣＡＡ与ＣＣＡ诊断靶微粒特异性的差别，并试探获取其纯化制品用于定量检测的标准系列。方法：对两组分进行了亲和层析及阴离子交换剂高效液相纯化分离，并应用单抗检测系统进行同相和异相交互测试。结果：Ｍｏｎｏ－Ｑ－ＨＰＬＣ（高效液相层析）梯度洗脱分离ＡＷＡｊ－ＴＣＡ可溶组分，可获得一个带阳离子活性的非结合ＣＣＡ－１洗脱峰及３个大小不等的、带阳离子活性的ＣＣＡ－２、ＣＣＡ－３及ＣＣＡ－４非结合洗脱峰，以及一个带阴离子活性ＣＡＡ－１洗脱峰。ＣＡＡ活性峰在峰谱上与ＣＣＡ－３有部分重叠。与单抗亲和层析纯品的活性对比测定显示ＣＣＡ－１与ＣＣＡ－２为该组分的主要构成，但ＣＣＡ－２及ＣＡＡ－１在本实验条件下均有微量的相互杂染。同相和异相双位点ＥＬＩＳＡ的４种组合交互检测，展示ＣＣＡ只能在捕获与检测抗体同为抗ＣＣＡ单抗的一种组合中被检出，而另３种组合只能测出ＣＡＡ组分。结论：血吸虫肠相关ＣＣＡ组分为一兼含两性电荷的分子混合体；而ＣＡＡ分子上具有一个可被抗ＣＣＡ单抗识别的活性表位位点，从而可能影响纯化分离和特异检测。