小麦籽粒DNA提取方法的比较及SSR反应体系的优化研究

作     者：丁海燕 丁晨 DING Haiyan;DING Chen

作者机构：大庆师范学院生物工程学院黑龙江大庆163712 

出 版 物：《麦类作物学报》 (Journal of Triticeae Crops)

年 卷 期：2016年第36卷第3期

页      面：287-291页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目(12513004) 大庆师范学院科学研究基金项目(12ZR04) 大庆市科技局科技计划项目(szdfy-2015-65) 

主　　题：小麦 种子 CTAB法 SDS法 SSR 

摘      要：为了快速获得较高质量的DNA用于SSR分析,并建立一套稳定的SSR反应体系,以小麦单粒干种子为材料,比较了CTAB法和SDS法获得的DNA条带清晰度和RNA残留带的清晰度;同时,研究了模板DNA浓度、引物浓度、dNTPs浓度以及Taq酶用量对SSR结果的影响。结果表明,CTAB法微量提取小麦干种子DNA可获得理想的扩增结果;SSR的最佳反应体系是：模板DNA浓度为4.0～4.8ng·μL^（-1）,Taq酶用量为1U,引物浓度为50～200nmol·L^（-1）,dNTPs浓度为50～500μmol·L^（-1）。