维生素C-悬滴法诱导小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞
Inducing the differentiation of mouse embryonic stem cells into cardiomyocytes by vitamin C-hanging drop method作者机构：首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科北京100029 中科院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室
出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)
年 卷 期：2014年第31卷第8期
页 面：1665-1667页
核心收录：
学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学]
基 金：北京市卫生系统高层次人才培养基金资助项目(2011-3-065) 北京市朝阳区科委社会发展、可持续发展与城乡一体化促进计划基金资助项目(SF1218)
摘 要：目的 利用维生素C作为诱导因子,采用悬滴法形成拟胚体,体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞并检测其分化效率,同时确定这种诱导方法的最佳维生素C浓度.方法 复苏小鼠胚胎干细胞,传代培养后,消化离心后重悬细胞,用悬滴法形成拟胚体,用含1×10-3、1×10-4、1×10-5、1×10-6 mol/L 4种不同浓度维生素C的分化培养基对其进行诱导分化,以不添加任何诱导剂作为对照组,观察各组小鼠出现跳动拟胚体的数量,并计算分化效率;免疫荧光染色检测心肌细胞特异标志物肌钙蛋白T（cTnT）;膜片钳实验检测心肌细胞自发性动作电位.结果 大量的自发跳动心肌细胞在诱导分化后12d左右开始出现.维生素C诱导小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的最佳浓度为1×10-4 mol/L,其分化出现跳动拟胚体的百分比为81.25％,显著高于不加诱导剂的对照组（12.50％）;跳动心肌细胞cTnT染色阳性;跳动心肌细胞检测到自发性动作电位.结论 最佳的维生素C浓度（1×10-4mol/L）能够明显提高体外悬滴法诱导小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的效率.
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