杆状病毒介导肝生长因子在兔骨髓间充质干细胞中的调控表达

作     者：郑超 戴闽 潘志敏 郭菲 涂以济 程细高 唐丽梅 Zheng Chao;Dai Min;Pan Zhimin;Guo Fei;Tu Yiji;Cheng Xigao;Tang Limei

作者机构：南昌大学第一附属医院骨科南昌330006 南昌大学第一附属医院烧伤研究所南昌330006 南昌大学第二附属医院骨科南昌330006 中国中医科学院针灸研究所北京100007 

出 版 物：《重庆医科大学学报》 (Journal of Chongqing Medical University)

年 卷 期：2014年第39卷第5期

页      面：641-645页

核心收录：

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81060147) 

主　　题：骨髓间充质干细胞 杆状病毒 转染 肝生长因子 强力霉素 调控表达 

摘      要：目的:建立转染高效可调控的携带肝生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)为目的基因的重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF,并探寻其在转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)后的最佳诱导浓度。方法:用转基因的方法构建重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF,随后转染BM-MSCs,用ELISA和Western blot检测不同浓度强力霉素(doxycycline,DOX)诱导体外培养兔BM-MSCs分泌的HGF浓度。结果:构建了高效可调控重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF,并且成功转染兔BM-MSCs,用系列浓度DOX诱导时ELISA和Western blot均检测到BM-MSCs中HGF的表达有DOX诱导剂量依赖关系并且连续7 d持续表达,且实验组的HGF的表达量明显高于对照组(P0.001)。结论:成功构建一次性转染、高效可调控的重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF,并实现对HGF表达的调控,当DOX诱导浓度为1μg/ml时为其体外最佳诱导浓度。