甘蓝抽薹开花抑制因子FLC与SVP体外表达及相互作用

作     者：杨朴丽 张丹华 刘智宇 许俊强 王志敏 汤青林 宋明 

作者机构：西南大学园艺园林学院南方山地园艺学教育部重点实验室重庆市蔬菜学重点实验室重庆400715 

出 版 物：《植物生理学报》 (Plant Physiology Journal)

年 卷 期：2013年第49卷第9期

页      面：935-942页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 09[农学] 0902[农学-园艺学] 090202[农学-蔬菜学] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(2012CB113900) 国家自然科学基金(31000908) 重庆市自然科学基金(2011BA1002) 中央高校基本科研业务费专项(XDJK2012B020) 国家大学生创新项目(201210635045) 

主　　题：甘蓝 FLC SVP 体外表达 蛋白质相互作用 

摘      要：甘蓝抽薹开花抑制因子FLC与SVP可能存在相互作用,从而调节开花时间。为进一步的验证该相互作用,以甘蓝‘ZQ’为材料,扩增了594 bp的FLC cDNA和726 bp的SVP cDNA序列,它们分别编码197和241个氨基酸,且均属MIKC型蛋白。NCBI比对发现FLC与BoFLC3同源性高达98%,SVP与BoSVP-a同源性高达99%。将甘蓝FLC和SVP分别与原核表达载体pET43.1a融合,构建重组质粒pET43.1a-FLC、pET43.1a-SVP,并转化宿主菌大肠杆菌BL21,均能够在体外表达目的蛋白。利用免疫共沉淀的原理及pET43.1a-FLC、pET43.1a-SVP融合蛋白序列中的6×His标签能与Ni+结合的特点,结合SDSPAGE,检测到体外表达蛋白FLC与SVP能相互作用并形成复合体,这为深入研究FLC与SVP互作机理及探讨其与抽薹开花因子的相互作用提供了理论依据和技术基础。