转基因油菜地高辛标记DNA探针杂交检测方法的建立

作     者：刘烜 郑文杰 赵卫东 贺艳 唐丹舟 刘辉 Liu Xuan;Zheng Wenjie;Zhao Weidong;He Yan;Tang Danzhou;Liu Hui

作者机构：天津出入境检验检疫局300201 

出 版 物：《口岸卫生控制》 (Port Health Control)

年 卷 期：2005年第10卷第4期

页      面：10-12页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100403[医学-营养与食品卫生学] 10[医学] 

基　　金：本研究由天津市科委重点项目资助 课题号033182811 

主　　题：杂交 PCR 转基因油菜 地高辛标记探针 杂交检测 DNA探针 地高辛标记 DIG-11-dUTP Southern杂交 硝酸纤维素膜 

摘      要：通过PCR扩增法制备转基因油菜外源筛选基因FMV35S启动子的DIG-11-dUTP标记DNA探针,与该基因PCR扩增产物进行Southern杂交,通过显色反应对商品化转基因油菜进行检测。本研究对反应基片带正电荷的尼龙膜和硝酸纤维素膜进行了比较,并比较了不同固定条件和杂交条件下的杂交结果。尼龙膜较之硝酸纤维素膜可更好的结合DNA片段,经紫外线照射交联5 分钟,与含甲酰胺的杂交液在45℃杂交30 min结果较为理想。