一种新的层析等电点聚焦技术提纯葡萄球菌肠毒素D

作     者：雷祚荣 RF Reiser MS Bergdoll 

作者机构：军事医学科学院微生物流行病研究所 美国威斯康辛大学食品研究所 

出 版 物：《军事医学科学院院刊》 (Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences)

年 卷 期：1989年第13卷第3期

页      面：205-210页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主　　题：葡萄球菌 肠毒素 等电点聚焦 

摘      要：我们成功地建立了一个新的层析等电点聚焦的三步程序.细菌培养液首先以CG-50吸附,洗脱出的粗毒素溶液在PBE_(94)柱上进行层析等电点聚焦.分别用5mMTris-Base pH9.4和Buffalyte_(8-4) pH5.4缓冲液洗脱,出现多个洗脱峰,即刻测定pH值.收集pH6.8～7.1的洗脱液,混合、浓缩,最后通过Sephacryl s-200过滤,以0.05M PBS pH6.8洗脱,出现3个峰,毒素在第1峰.毒素纯度为98%,回收率89%,p17.6,MW28500,SDS-PAGE上1条带.以^(125)I标记SED作探针的电泳转移和放射自显影均证明了提纯SED的免疫学特异性.免疫扩散试验,即使200μg/ml SED与不产毒素的FRI-184抗血清,也未有可见沉淀线.