肾组织冰冻切片中血红素氧合酶-1的免疫组织化学检测

作     者：田恒宇 周汉新 TIAN Heng-yu;ZHOU Han-xin

作者机构：暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院肝胆胰外科深圳518020 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2013年第30卷第9期

页      面：1921-1923,F0003,F0004页

核心收录：

学科分类：100208[医学-临床检验诊断学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目（81260124） 

主　　题：生物素 卵白素 免疫组织化学 大鼠 

摘      要：目的 探讨大鼠肾脏组织冰冻切片中血红素氧合酶-1（HO-1）的免疫组织化学检测方法及其干扰因素.方法 腹腔内注射钴原卟啉（CoPP）诱导Wistar大鼠（n=24）肾脏高表达HO-1；比较常规链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法（n=8）、SP＋蛋清封闭法（n=8）和Dako EnVision二步法（n=8）消除非特异性染色的效果,并通过检测已知阳性组织的HO-1表达加以验证.结果 Western blot法检测证实CoPP成功诱导全部24只Wistar大鼠肾脏高表达HO-1.用免疫组织化学法检测HO-1在大鼠肾脏组织中的表达时,可见（1）正常大鼠肾组织仅部分大血管区有内源性过氧化物酶的着色,能被0.3％H202·甲醇或3％ H202消除；（2）正常大鼠肾组织有丰富的内源性生物素表达,常规SP法染色（n=8）出现较强的非特异性染色；SP＋蛋清封闭法染色（n=8）不能消除非特异性染色,反而有放大作用；Dako EnVision二步法（n=8）可以有效消除非特异性染色,良好显示HO-1在肾脏组织中的分布.结论 内源性生物素是冰冻切片免疫组织化学染色的主要干扰因素；常规SP法或加用蛋清封闭不能消除其干扰；EnVision二步法可以有效避免非特异性干扰,良好的显示HO-1在阳性肾脏组织中的表达.