Taqman MGB探针快速定量检测VHSV方法的研究

作     者：许建明 张念之 蒋一男 张利峰 夏春 

作者机构：中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室北京100094 北京出入境检验检疫局北京101113 

出 版 物：《高技术通讯》 (Chinese High Technology Letters)

年 卷 期：2010年第20卷第2期

页      面：208-213页

核心收录：

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：国家质检总局(2007IK031)资助项目 

主　　题：病毒性出血性败血症病毒(VHSV) Taqman MGB探针 荧光RT—PCR法 定量检测 

摘      要：为建立准确实时地定量检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV),在VHSV-N基因保守区设计了Taqman MGB探针与引物对,随后,采用体外转录技术获得了VHSV-N基因RNA,并以此为绝对定量标准品,建立了绝对定量(AQ)检测VHSV的实时荧光RT-PCR法(AQ-RT-PCR方法),并与世界动物卫生组织(OIE)推荐的普通RT-PCR法进行了比较。此荧光RT-PCR法特异性好,与其他鱼类弹状病毒无交叉反应。检测线性范围为10^(10)～10~2拷贝/反应,灵法度达10~2拷贝/反应。此检测灵敏度比OIE推举的RT-PCR法高出5个数量级,比嵌套RT-PCR高出1个数量级。此法是出入境检疫VHSV的有效方法。