玉米In5-2启动子功能区域在洋葱瞬时表达系统中的分析
Analyses of Functional Region of Maize In5-2 Promoter in Transient Expression System of Onion作者机构：中国农业大学食品科学与营养工程学院 农业部转基因生物食用安全检验监督测试中心
出 版 物：《农业生物技术学报》 (Journal of Agricultural Biotechnology)
年 卷 期：2010年第18卷第6期
页 面：1073-1078页
核心收录：
学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 0828[工学-农业工程] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
主 题：洋葱表皮细胞 根癌农杆菌 GUS基因 瞬时表达 玉米In5-2启动子
摘 要：本研究旨在通过对根癌农杆菌侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,明确In5-2启动子的乙酰苯胺类化合物诱导元件的具体位置。在本研究中采用根癌农杆菌(A grobacterium tume faciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS基因的瞬间表达的影响。结果显示,在OD600值为0.8的农杆菌液中感染15min,共培养3d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统。同时,构建了含不同长度的玉米(Zeamays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰苯胺类化合物诱导元件位于ATG上游-220～-143bp之间。结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析。
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