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基于整体材料的微流控芯片反相液相色谱-串联质谱平台用于蛋白质分析

Microchip-based reversed-phase liquid chromatography-tandem mass spectrometry platform for protein analysis

作     者:梁玉 吴慈 戴忠鹏 梁作成 梁振 张丽华 张玉奎 LIANG Yu;WU Ci;DAI Zhongpeng;LIANG Zuocheng;LIANG Zhen;ZHANG Lihua;ZHANG Yukui

作者机构:中国科学院分离分析化学重点实验室大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心辽宁大连116023 中国科学院研究生院北京100039 

出 版 物:《色谱》 (Chinese Journal of Chromatography)

年 卷 期:2011年第29卷第6期

页      面:469-474页

核心收录:

学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基  金:国家自然科学基金(20935004) 科技部基础研究计划(2007CB714503,2007CB914100)和科技部科技支撑计划(2008BAK41B02,2009BAK59B02)项目 

主  题:微流控芯片 反相液相色谱 串联质谱 整体材料 蛋白质分析 

摘      要:微流控芯片高效液相色谱-串联质谱系统具有高通量、高灵敏度等优点,已成为生物样品分析的热点领域之一。本文在玻璃芯片上以甲基丙烯酸十二酯(LMA)和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TMPTMA)为单体,制备了以聚丙烯酸酯整体材料为固定相的捕集柱和分离柱。通过在芯片通道末端连接细内径的毛细管作为芯片-质谱接口,并以常规的液相色谱泵和微阀控制流体,构建了芯片反相液相色谱-电喷雾串联质谱(RPLC-ESI-MS/MS)平台,并将其用于分析牛血清白蛋白(BSA)的酶解产物。经过3次平行分析,BSA的序列覆盖率分别为39.37%、37.89%和34.10%(相对标准偏差为7.3%)。采用不同批次制作的芯片构建RPLC-ESI-MS/MS平台,对BSA酶解产物进行分析,其序列覆盖率相当。上述结果表明,该平台具有灵敏度高和重现性好等优点,有望用于蛋白质样品的快速分离和高灵敏度鉴定。

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