益智仁抑制PFKFB3介导的糖酵解对糖尿病肾病上皮间充质转化的影响

作     者：李小燕 袁勇 王晶 马天鹏 李丽丹 颜子杰 肖曼 谢毅强 

作者机构：贵州中医药大学 三亚市中医院 成都中医药大学 海南医科大学中医学院 海南医科大学基础医学与生命科学学院热带转化医学教育部重点实验室 

出 版 物：《海南医科大学学报》 (Journal of Hainan Medical University)

年 卷 期：2025年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金-面上项目(82174334) 代谢性疾病中医药调控四川省重点实验2022年开放基金(SZKF202203) 

主　　题：益智仁 糖尿病肾病 糖酵解 上皮间充质转化 

摘      要：目的：利用体内和体外模型探究益智仁对糖尿病肾病上皮间充质转化的潜在治疗作用，并研究其作用机制。方法：体内实验：db/m小鼠作为空白组，将db/db小鼠分为模型组、阳性药物对照组（恩格列净组）、益智仁低、中、高剂量组。通过HE染色观察肾脏组织病理改变，采用RT-qPCR、Western blot检测肾脏组织中PFKFB3、E-cad、Col3α1和Vimentin的mRNA及蛋白表达水平。体外实验：将HK-2细胞分为空白组、模型组以及益智仁含药血清不同剂量组（低、中、高剂量组），同时设立恩格列净阳性对照组。经过24h的药物干预后，首先通过划痕实验评估各组细胞的迁移能力，并据此确定最佳药物浓度。随后，采用RT-qPCR和Western blot技术，检测HK-2细胞中PFKFB3、E-cad、Col3α1和Vimentin的mRNA及蛋白表达水平；利用免疫荧光技术进一步验证EMT中关键蛋白Col3α1的表达情况。结果：体内实验：HE染色显示：与空白组相比，模型组肾小球体积增大、基底膜增厚，肾小管上皮细胞肿胀、管腔变窄，益智仁及恩格列净干预后各治疗组肾脏病理变化均有不同程度的减轻；在mRNA及蛋白表达水平中，与空白组相比，模型组E-cad表达水平显著下调（P0.05），PFKFB3、Col3α1、Vimentin的表达水平则显著上调（P0.05），与模型组比较，各给药组E-cad表达上调（P0.05），PFKFB3、Col3α1、Vimentin的表达显著下调（P0.05）。体外实验：与空白组相比，模型组细胞的迁移能力显著增强（P0.05），与模型组比较，各含药血清组以及恩格列净组的HK-2细胞迁移能力均有所降低（P0.05），其中以10%含药血清组降低最为明显；在mRNA及蛋白表达水平中，与空白组相比，模型组E-cad表达水平显著下调（P0.05），PFKFB3、Col3α1、Vimentin的表达水平则显著上调（P0.05），与模型组比较，各给药组E-cad的表达明显上调（P0.05），PFKFB3、Col3α1、Vimentin的表达显著下调（P0.05）；与空白组比较，模型组Col3α1荧光表达水平升高，给予药物处理后Col3α1荧光表达水平下降。结论：益智仁通过抑制PFKFB3介导的异常糖酵解改善糖尿病肾病上皮间充质转化。