猪丁型冠状病毒非结构蛋白NSP9和NSP16抑制IFN-Ⅰ的表达

作     者：刘思雨 赵硕 欧阳康 何颖 卢冰霞 赵武 段群棚 许心婷 全琛宇 许艺兰 李斌 程珂 秦毅斌 LIU Siyu;ZHAO Shuo;OUYANG Kang;HE Ying;LU Bingxia;ZHAO Wu;DUAN Qunpeng;XU Xinting;QUAN Chenyu;XU Yilan;LI Bin;CHENG Ke;QIN Yibin

作者机构：广西壮族自治区兽医研究所、广西兽医生物技术重点实验室、农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西南宁产530001 广西大学动物科学技术学院、广西高校动物疫病预防与控制重点实验室、广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心广西南宁530005 广西农垦永新畜牧集团有限公司广西南宁530016 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2025年第55卷第1期

页      面：1-10页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设专项(nycytxgxcxtd-2023-15-02) 南宁市科技重大专项(20232039) 广西基本科研业务费专项(桂科专项23-3/22-4/22-3/24-7/24-3/24-11) 广西兽医生物技术重点实验室开放基金项目(22-035-32-B-02,23-035-32-B-02,23-035-32-B-01) 广西农业科技自筹经费项目(Z2023034,Z202225) 广西桂垦牧业科学研究与技术开发项目(桂垦牧科2022004) 

主　　题：猪丁型冠状病毒 NSP9蛋白 NSP16蛋白 Ⅰ型干扰素 

摘      要：为探究猪丁型冠状病毒(PDCoV)非结构蛋白NSP9和NSP16对宿主细胞Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)的调控作用,在293T细胞中过表达NSP9、NSP16,通过双荧光素酶报告系统和qRT-PCR评估NSP9、NSP16对仙台病毒(Se V)诱导产生的IFN-β的影响,再通过q RT-PCR、Western-blot检测NSP9、NSP16对RIG-Ⅰ样受体(RLRs)信号通路的影响。结果显示,NSP9、NSP16能显著抑制和降低Se V诱导的IFN-β启动子活性、IFN-β与干扰素刺激基因15(ISG15)的转录水平。同时,过表达NSP9可以显著降低RLRs信号通路中视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)、黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、TANK结合激酶1(TBK1)和干扰素调节因子3(IRF3)的转录水平,并显著抑制RIG-Ⅰ、MDA5、线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)和TBK1的表达;而过表达NSP16可以显著降低RIG-Ⅰ和MDA5的转录水平,并显著抑制RIG-Ⅰ的表达和IRF3的磷酸化。结果表明,PDCoV的非结构蛋白NSP9和NSP16可能通过调控RLRs信号通路来抑制IFN-Ⅰ产生,为阐明PDCoV的致病机制、寻找新的治疗靶点、开发新型抗病毒药物奠定了理论基础。