四物汤含药血清对多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞自噬的影响

作     者：邵艳社 许雪梅 杨宝芹 李会娟 姬霞 SHAO Yanshe;XU Xuemei;YANG Baoqin;LI Huijuan;JI Xia

作者机构：河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院妇产科郑州450011 河南中医药大学第一附属医院生殖科郑州450003 

出 版 物：《中国药房》 (China Pharmacy)

年 卷 期：2025年第36卷第2期

页      面：185-190页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：河南省中医药科学研究专项课题(No.20-21ZY2071,No.2024ZY2073) 河南省中医药青苗人才培养项目(No.豫中医16号) 

主　　题：四物汤 含药血清 多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 FBP1/mTOR信号通路 

摘      要：目的 探讨四物汤含药血清对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞自噬的影响及潜在机制。方法 取3月龄雌性SD大鼠,分别以生理盐水和不同剂量四物汤灌胃,制备空白血清和不同浓度[0.52、1.04、2.08 g/(kg·d)]四物汤含药血清。筛选四物汤含药血清干预浓度后,将人卵巢颗粒细胞KGN分为对照组(细胞不进行任何处理)、脱氢表雄酮(DHEA)组(以50μmol/L的DHEA处理细胞48 h)、空白血清组(以50μmol/L的DHEA处理细胞48 h后,再用10%空白血清处理72 h)、中浓度四物汤含药血清组(以50μmol/L的DHEA处理细胞48 h后,再用10%中浓度四物汤含药血清处理72 h),观察各组细胞中的自噬体数量以及通路相关蛋白[果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)]、自噬相关蛋白[p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)]和FBP1 mRNA的表达水平。将(转染)细胞分为四物汤组(以50μmol/L的DHEA处理细胞48 h后,再用10%中浓度四物汤含药血清处理72 h)、四物汤+si-NC组(以50μmol/L的DHEA处理阴性对照小干扰RNA转染细胞48 h后,再用10%中浓度四物汤含药血清处理72 h)、四物汤+si-FBP1组(以50μmol/L的DHEA处理FBP1小干扰RNA转染细胞48 h后,再用10%中浓度四物汤含药血清处理72 h),考察敲低FBP1对四物汤上述作用的影响。结果 与对照组比较,DHEA组细胞的自噬体数量明显增加,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p-mTOR/mTOR、FBP1蛋白及mRNA的表达水平均显著升高,p62蛋白的表达水平显著降低(P0.05)。与DHEA组和空白血清组比较,中浓度四物汤含药血清组细胞的自噬体数量明显减少,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著降低,p-mTOR/mTOR和p62蛋白、FBP1蛋白及mRNA的表达水平均显著升高(P0.05)。敲低FBP1后,与四物汤+si-NC组比较,四物汤+si-FBP1组细胞的存活率、p62蛋白的表达水平、FBP1蛋白及mRNA的表达水平、p-mTOR/mTOR均显著降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著升高(P0.05)。结论 四物汤可通过上调KGN细胞中FBP1蛋白及mRNA的表达来促进mTOR蛋白的磷酸化,从而抑制其自噬。