基于细胞培养基中血清水平优化探索赭曲霉毒素A对HK-2细胞的毒性作用
Exploration of the toxic effects of ochratoxin A on HK-2 cells by optimizing serum level in cell culture medium作者机构：上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所上海201403
出 版 物：《南京农业大学学报》 (Journal of Nanjing Agricultural University)
年 卷 期：2025年第48卷第1期
页 面：220-229页
核心收录：
学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
基 金：上海市科技兴农项目(沪农科创字〔2021〕第3-2号)
主 题：赭曲霉毒素A 血清水平 HK-2细胞 超高效液相色谱-串联质谱技术
摘 要：[目的]本文旨在探讨细胞培养基中添加不同水平血清对赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)毒性的影响,以期更深入了解OTA的毒性,同时为其他OTA体外毒性研究提供重要参考。[方法]测定OTA对人肾皮质近曲小管上皮细胞(human proximal tubule-derived epithelial cells,HK-2)细胞活力的影响,同时利用超高效液相色谱-串联质谱技术检测细胞上清液中OTA浓度以间接反应细胞对OTA的摄入量,分析培养基中不同水平血清对OTA毒性的影响。[结果]细胞培养基中添加5%的血清在48 h内不会影响细胞活力,可以作为细胞正常培养条件;添加2%的血清在36 h不会影响细胞活力,可以作为配制OTA工作液的细胞处理条件。基于优化的细胞培养及处理条件,OTA对HK-2细胞活力的影响结果表明,OTA抑制细胞活力呈现时间和剂量依赖性,OTA处理HK-2细胞12、24、36 h的IC50分别为39.29、6.28和2.72 μmol·L^(-1)。同时OTA可以时间依赖性极显著提高细胞释放乳酸脱氢酶水平,并损伤细胞膜的完整性(P0.01)。[结论]细胞培养基中添加不同水平的血清会影响OTA的毒性,且血清水平越高,对OTA毒性影响越大。当使用2%血清的培养基配制OTA工作液时,可在不影响细胞活力的前提下最大限度降低血清水平对OTA毒性的影响。
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