小麦族拟鹅观草属Adh基因PCR扩增条件优化

作     者：张宁宁 刘全兰 李磊 ZHANG Ning-ning;LIU Quan-lan;LI Lei

作者机构：青岛科技大学生物工程与技术系青岛266042 

出 版 物：《科学技术与工程》 (Science Technology and Engineering)

年 卷 期：2009年第9卷第6期

页      面：1397-1401页

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：国家自然科学基金(30600033) 青岛科技大学引进人才启动基金资助 

主　　题：拟鹅观草属 基因组DNA Adh基因 PCR优化 

摘      要：拟开发适用于小麦族拟鹅观草属植物系统发育研究的低拷贝核基因,即Adh基因。通过探索模板DNA、Mg2+、dNTP和引物的浓度,以及退火温度等因素对Adh基因扩增的影响,建立最优PCR体系。在25μL最优PCR反应体系中包括如下成分:2.5μL10×PCR缓冲液,0.6μL模板DNA(约15ng),1.5mmolMg2+,0.15mmoldNTP混合液,0.12μmol正向和反向引物,0.75UExTaq酶;退火温度为55℃。优化后的体系得到清晰目的条带,可用于后续研究。