阿卡维基转移酶的异源表达及转糖基作用

作     者：薛正莲 王雨晴 李闯 李丹丹 朱司宝 李翔飞 XUE Zhenglian;WANG Yuqing;LI Chuang;LI Dandan;ZHU Sibao;LI Xiangfei

作者机构：安徽工程大学生物与食品工程学院安徽芜湖241000 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2025年第46卷第2期

页      面：81-88页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(32300059) 安徽省工业微生物分子育种工程实验室开放基金项目(ELMB-04) 安徽省自然科学基金青年科学基金项目(2108085QC95) 

主　　题：阿卡维基转移酶 阿卡波糖 异源表达 转糖基作用 酶学性质 

摘      要：为深入研究阿卡波糖合成途径中关键酶——阿卡维基转移酶(acarviosyltransferase,ATase)的结构性质和催化功能,从犹他游动放线菌Actinoplanes ***50基因组中扩增其编码基因acbD,并实现在Escherichia coli中的异源表达。生物信息学分析表明acbD表达产物ATase的保守结构域与糖苷水解酶家族13的环糊精糖基转移酶高度相似,且存在信号肽和跨膜区。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,在去除信号肽的编码序列后,acbD的可溶性表达水平提高了22.4倍。重组ATase的最适催化温度和最适反应pH值分别为30℃和7.0。底物谱分析表明重组ATase催化D-水杨苷的活力最高,为82.85 U/mL,其次是L-山梨糖(63.75 U/mL),也是首次发现L-山梨糖可作为ATase的优良糖基供体。以上结果为进一步明确ATase的催化机制奠定了基础。