华支睾吸虫NOSIP对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7氧化应激作用的研究

作     者：边萌 周翰宗 朱宇 许青霞 

作者机构：郑州大学附属肿瘤医院(河南省肿瘤医院)检验科 郑州人民医院肝胆外科 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2024年第12期

页      面：1676-1680页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：河南省医学科技攻关计划省部共建重点项目(SBGJ202102070) 

主　　题：华支睾吸虫 一氧化氮合酶相互作用蛋白 氧化应激 RAW264.7细胞 

摘      要：目的 探讨不同浓度的重组华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白（rCsNOSIP）对脂多糖（LPS）诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7氧化应激的作用的研究，为探究华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白（CsNOSIP）对宿主氧化应激作用奠定基础。方法 将纯化蛋白rCsNOSIP去内毒素，取对数生长期的RAW264.7细胞，1×10～6个/孔接种于六孔板中，分为对照组、LPS组（1μg/mL）、LPS+5μg/mL rCsNOSIP组、LPS+10μg/mL rCsNOSIP组、LPS+20μg/mL rCsNOSIP组和LPS+无关蛋白组；其中LPS+5μg/mL rCsNOSIP组、LPS+10μg/mL rCsNOSIP组、LPS+20μg/mL rCsNOSIP组分别加入不同浓度的去内毒素的rCsNOSIP，终浓度分别为5、10、20μg/mL。分别与RAW264.7细胞作用24 h，用流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平；Griess法测定各组细胞培养上清液中一氧化氮（NO）水平；应用丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒检测各组细胞培养上清液中MDA及SOD水平。结果 与对照组比较，LPS组NO、ROS、MDA和SOD水平显著升高，差异均有统计学意义（t=8.139、14.300、4.578、4.717,P均0.05）；与LPS组比较，LPS+5μg/mL rCsNOSIP组、LPS+10μg/mL rCsNOSIP组、LPS+20μg/mL rCsNOSIP组NO、ROS、MDA均升高，差异均有统计学意义（t=5.807、13.110、15.320,9.900、11.980、17.440,5.048、10.960、13.830,P均0.05）；与LPS组比较，LPS+5μg/mL rCsNOSIP组、LPS+10μg/mL rCsNOSIP组、rCsNOSIP组、LPS+20μg/mL rCsNOSIP组SOD水平降低，差异均有统计学意义（t=7.111、12.090、11.780,P均0.05）。结论 CsNOSIP可能通过加重巨噬细胞氧化应激损伤，促进肝脏疾病的发生。