葡萄VvWRKY53的分子特性与表达模式分析

作     者：董梦迪 吴佳鸿 周悦妍 郝博雯 张玮 彭军波 邢启凯 DONG Mengdi;WU Jiahong;ZHOU Yueyan;HAO Bowen;ZHANG Wei;PENG Junbo;XING Qikai

作者机构：北京市农林科学院植物保护研究所/北方果树病虫害绿色防控北京市重点实验室北京100097 山西农业大学植物保护学院山西晋中030801 国家林业和草原局生物灾害防控中心沈阳110034 

出 版 物：《中国农业大学学报》 (Journal of China Agricultural University)

年 卷 期：2025年第30卷第2期

页      面：40-50页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基　　金：国家现代农业产业技术体系资助项目(CARS-29) 国家自然科学基金项目(31801686) 北京市农林科学院科技创新能力建设项目(KJCX20190406) 

主　　题：葡萄 可可毛色二孢 WRKY转录因子 生物信息学分析 基因表达 

摘      要：为探究VvWRKY53生物学功能,以葡萄品种‘无核白’为材料,利用逆转录PCR技术(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)成功克隆获得一条CDS长为453 bp的葡萄WRKY53基因。利用生物信息学手段对该基因及其编码蛋白的序列特征进行分析,利用烟草瞬时表达方法对候选蛋白进行亚细胞定位分析,通过实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测该转录因子在喷施水杨酸(SA)、脱落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)4种激素,几丁质(chitin)和鞭毛蛋白(flg22)2种激发子以及可可毛色二孢菌接种后的表达模式,利用酵母系统确定其转录活性。结果表明:VvWRKY53编码蛋白质分子质量为18.1 ku,理论等电点(pI)为9.67。亚细胞定位结果显示VvWRKY53蛋白定位于烟草细胞核。系统进化树结果表明该转录因子与拟南芥AtWRKY45、AtWRKY75蛋白亲缘关系较近。qRT-PCR结果表明SA、MeJA和ACC喷施‘无核白’葡萄叶片后,VvWRKY53基因的相对表达水平均发生变化;ABA喷施后,该基因相对表达量逐渐上升;chitin和flg22处理均能快速诱导该基因的相对表达。可可毛色二孢菌接种‘夏黑’半木质化枝条后,VvWRKY53基因的相对表达持续上调;在酵母中证实VvWRKY53具有转录激活活性。综上,葡萄转录因子VvWRKY53在可可毛色二孢菌侵染的过程中发挥作用。