表达人乳头瘤病毒16型E6E7的重组腺病毒载体疫苗种子库遗传稳定性研究

作     者：吴洁 陈科达 高孟 毛子安 陈刚 金素凤 庄昉成 吴小红 姜云水 WU Jie;CHEN Ke-da;GAO Meng;CHEN gang

作者机构：浙江省医学科学院病毒病研究所 杭州310053 浙江普康生物技术股份有限公司 杭州310053 浙江省医学生物工程疫苗研发重点实验室 杭州310053 

出 版 物：《国际流行病学传染病学杂志》 (International Journal of Epidemiology and Infectious Disease)

年 卷 期：2013年第40卷第3期

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学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：浙江省医学生物工程疫苗研发重点实验室，杭州市科技局重大科技创新项目 

主　　题：人乳头瘤病毒16 腺病毒载体 种子库 遗传稳定性 

摘      要：目的 了解表达人乳头瘤病毒(HPV) 16型E6和E7融合蛋白的重组腺病毒载体(Ad-HPV16E6E7)疫苗的主种子库(MSB)和工作种子库(WSB)的遗传稳定性.方法 通过显微镜检查和病毒感染效价测定实验测定Ad-HPV16E6E7 MSB和WSB的感染性滴度;采用PCR扩增法鉴定HPV16E6E7目的基因稳定性;采用Western印迹法和免疫荧光法鉴定Ad-HPV16E6E7目的蛋白表达;采用C57BL/6小鼠TC-1肿瘤细胞生长抑制试验评价Ad-HPV16E6E7的生物学效应.结果 Ad-HPV16E6E7的MSB和WSB的感染性滴度分别为6.31×109 IU/mL和3.00×109 IU/mL;插入目的基因和表达目的蛋白稳定;小鼠TC-1肿瘤生长抑制试验表明MSB和WSB滴度的数量级在109 IU/mL时,小鼠抑瘤率达100％,与对照组相比差异均有统计学意义(x2=20.00、20.00,P均0.01).结论 Ad-HPV16E6E7疫苗的种子库遗传稳定,符合将来疫苗研发的要求.