表达禽流感病毒核蛋白基因重组禽痘病毒的构建及其免疫保护性研究

作     者：乔传玲 于康震 姜永萍 张建林 邓国华 孟庆文 田国斌 唐秀英 

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 农业部动物流感研究中心 农业部动物流感研究中心 农业部动物流感研究中心哈尔滨150001 农业部动物流感研究中心哈尔滨150001现在农业部畜牧兽医局工作 

出 版 物：《中国农业科学》 (Scientia Agricultura Sinica)

年 卷 期：2003年第36卷第6期

页      面：704-708页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主　　题：禽流感病毒 重组禽痘病毒 核蛋白基因 免疫保护性 

摘      要：从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1)核蛋白 (NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段 ,将其亚克隆到pSY5 38质粒 ,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY5 38质粒 ,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体pSY6 81,从而构建出表达核蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体pSY(NP +LacZ)。应用脂质体介导的方法将转移载体转染已感染禽痘病毒S FPV 0 17的鸡胚成纤维细胞 ,在X gal存在的条件下 ,利用蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化以及PCR、Western blot鉴定 ,结果证明 ,获得了能高效表达AIVNP蛋白的重组禽痘病毒rFPV NP。SPF鸡体内的免疫保护试验结果表明 ,它能够诱导机体产生较高水平的NP特异性抗体 ,并对H5N1和H7N1这 2种亚型高致病力禽流感病毒的攻击提供一定的保护。