DosR抗原Rv2626c通过lncRNA MacORIS诱导巨噬细胞活化的结核潜伏感染机制研究

作     者：汪兆慧 郑振鲁 李瑞娜 马媛媛 徐辉 魏振宏 贾彦娟 齐晓明 高小玲 WANG Zhaohui;ZHENG Zhenlu;LI Ruina;MA Yuanyuan;XU Hui;WEI Zhenhong;JIA Yanjuan;QI Xiaoming;GAO Xiaoling

作者机构：洛阳市妇幼保健院医学遗传与产前诊断科河南洛阳471099 甘肃中医药大学甘肃兰州730000 海南省人民医院检验科海南海口570311 甘肃省人民医院临床研究与转化医学研究所甘肃兰州730000 

出 版 物：《检验医学》 (Laboratory Medicine)

年 卷 期：2024年第39卷第10期

页      面：923-932页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81830372) 

主　　题：长链非编码RNAMacORIS Rv2626c 巨噬细胞 结核潜伏感染 

摘      要：目的 探讨结核潜伏感染(LTBI)表达的DosR抗原Rv2626c在巨噬细胞活化中的作用和长链非编码RNA(lncRNA)MacORIS对其的调控作用。方法 将人急性单核细胞白血病细胞系THP-1诱导为巨噬细胞,根据转染物的不同分为4组:阴性对照(NC)组[转染NC-小干扰RNA(siRNA) 24 h]、MacORIS-siRNA组(转染MacORIS-siRNA 24 h);NC-siRNA+重组蛋白Rv2626c(rRv2626c)组(转染NC-siRNA 24 h,再用3μg·mL^(-1)rRv2626c刺激24h)、MacORIS-siRNA+rRv2626c组(转染MacORIS-siRNA24h,再用3μg·mL^(-1)rRv2626c刺激24h)。检测各组细胞lncRNAMacORIS、Toll样受体(TLR)2、TLR4、表面共刺激分子(CD80、CD86、CD163、CD206)、吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-1β的表达情况。采用生物信息学方法预测并构建lncRNA MacORIS的竞争内源RNA(ceRNA)网络,对lncRNA MacORIS潜在的靶微小RNA进行验证。结果 rRv2626c可有效促进巨噬细胞lncRNA MacORIS和IDO1上调(P0.05)。rRv2626c可依赖于lncRNA MacORIS诱导THP-1细胞中TLR2的表达(P0.05)。rRv2626c可依赖于lncRNA MacORIS上调巨噬细胞中CD80、CD86、TNF-α、IL-1β的表达(P0.001)。与NC组比较,MacORIS-siRNA组miR-141-3p、miR-150-5p、miR-33-5p、miR-200-3p和miR-203-3p相对表达量均显著升高(P0.05)。结论 rRv2626c可促进巨噬细胞极化到M1表型,并促进TLR2和炎症因子表达,这些变化均依赖于lncRNA MacORIS。lncRNA MacORIS可负调控miR-141-3p、miR-150-5p、miR-33-5p、miR-200-3p和miR-203-3p的表达。