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两亲性肽自组装凝胶与神经干细胞相容性研究

The Cyto-compatibility of Self-assembly Hydrogel from the Amphipathic Peptide Containing IKVAV with NSCs

作     者:宋玉林 郑启新 郑剑锋 黄华斌 SONG Yulin;ZHENG Qixin;ZHENG Jianfen;HUANG Huabin

作者机构:南昌大学第二附属医院骨科江西省南昌市330006 华中科技大学同济医学院协和医院骨科湖北省武汉市430000 

出 版 物:《组织工程与重建外科杂志》 (Journal of Tissue Engineering and Reconstructive Surgery)

年 卷 期:2008年第4卷第4期

页      面:192-195页

学科分类:08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主  题:两亲性肽 三维凝胶 细胞相容性 三维培养体系 二维培养体系 

摘      要:目的将鼠神经干细胞(Neural Stem Cells,NSCs)接种于肽自组装凝胶内部,观察凝胶与NSCs的相容性。方法机械分离法从乳鼠大脑皮层获取细胞,免疫组织化学鉴定;1wt%两亲性肽溶液在DMEM/F12触发下自组装为三维多孔凝胶,透射电镜观察凝胶超微结构;1×105 cells/ml的NSCs悬液分别接种于凝胶内部(三维培养体系)及多聚赖氨酸包被的盖玻片表面(二维培养体系),Calcein-AM和PI荧光标记,激光共聚焦显微镜观察NSCs的成活及增殖情况,CCK-8绘制细胞生长曲线。结果分离的细胞为Nestin阳性的NSCs,可分化为NSE阳性神经元及GFAP阳性胶质细胞;透射电镜显示凝胶由纳米纤维构成,纤维直径有3~5nm,长度100~1500nm;Calcein-AM/PI荧光双标显示:三维培养体系中,1h后NSCs有部分死亡;培养24h时,开始增殖;培养48h时,细胞增殖活跃,聚集成团。较二维培养明显。CCK-8酶标法显示:三维培养体系细胞增殖活力高于二维培养,且有显著性差异(p0.05)。结论肽自组装三维凝胶与NSCs具有良好的细胞相容性,可促进NSCs增值。

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