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一起肉毒梭菌中毒事件的实验室诊断

作     者:钱璐 梁胜楠 董晶 徐雪芳 胡彬 张香媛 崔方元 程利红 窦继波 

作者机构:聊城市疾病预防控制中心 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室 山东省疾病预防控制中心 

出 版 物:《中国食品卫生杂志》 (Chinese Journal of Food Hygiene)

年 卷 期:2024年第08期

页      面:916-921页

核心收录:

学科分类:1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100403[医学-营养与食品卫生学] 10[医学] 

基  金:山东省医药卫生科技项目(202412060988) 

主  题:肉毒梭菌 肉毒毒素 食物中毒 实验室诊断 全基因组测序 

摘      要:目的 对2023年11月发生的1起疑似肉毒中毒事件的相关样本进行实验室检测,对分离到的一株A型肉毒梭菌(C. botulinum)进行全基因组测序(WGS)。方法 对食品、病例粪便和环境样本应用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)快速检测肉毒毒素基因。参照GB 4789.12—2016对样本进行前处理,经接种疱肉培养基和TPGYT培养基增菌培养5 d,通过动物试验进行毒素检出、确证和定性实验,采用卵黄琼脂平板分离和纯化菌株,并用API 20A和VITEK MS做菌种鉴定。同时对分离得到的菌株开展WGS,分析菌株的遗传特征。结果 病例粪便样本A型肉毒毒素基因阳性,通过动物试验检出A型肉毒毒素,利用卵黄琼脂平板成功分离A型肉毒梭菌RD1和RD2。其他样品均为阴性。WGS分析显示,该菌为肉毒梭菌,共有12个毒素编码相关基因,染色体上有3个噬菌体序列,wg-SNPs分析显示RD1和RD2与BrDura亲缘关系最近。结论 此次实验按照国家标准和本实验室建立的荧光定量PCR方法进行鉴定,检测方案和结果为临床A型肉毒中毒提供参考。

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