小型猪后肢去负荷模拟失重模型的建立与组织损伤研究

作     者：涂颖欣 纪依澜 王菲 杨东明 王冬冬 孙芷馨 戴悦欣 王言吉 阚广捍 吴斌 赵德明 杨利峰 TU Yingxin;JI Yilan;WANG Fei;YANG Dongming;WANG Dongdong;SUN Zhixin;DAI Yuexin;WANG Yanji;KAN Guanghan;WU Bin;ZHAO Deming;YANG Lifeng

作者机构：中国农业大学动物医学院 中国航天员科研训练中心 

出 版 物：《实验动物与比较医学》 (Laboratory Animal and Comparative Medicine)

年 卷 期：2024年第44卷第05期

页      面：475-486页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 100107[医学-航空、航天与航海医学] 

基　　金：国家重点研发计划“实验动物新品种、新品系开发与评价”(2022YFF0710501) 航天医学基础与应用国家重点实验室研究基金资助自主研究项目“模拟失重和压力变化复合因素对小型巴马猪咽鼓管功能变化规律研究”(SMFA22B05) 

主　　题：模拟失重 小型猪 动物模型 后肢去负荷 

摘      要：目的 利用小型猪多个系统组织结构和功能接近于人类的特性，建立模拟失重动物模型，观察其病理生理学变化，为航空航天失重环境研究提供新方法。方法 选取9头普通级小型猪，随机分为实验组（n=7）和对照组（n=2）。实验组小型猪使用定制金属笼固定，帆布吊带悬挂使其后肢离地去负荷，身体与地面呈-20°角，模拟失重30 d （每天24 h）。通过采集不同时间点各组小型猪的体重、血容量、血生化指标等数据，对其基础体征的变化进行统计分析。实验结束后，对小型猪实施安乐死并解剖取材，对心血管、骨骼、骨骼肌等各系统组织脏器进行HE、Masson染色后的组织病理学观察，并对各动脉血管厚度、骨骼肌肌纤维直径进行统计分析。同时，采用蛋白质免疫印迹法检测骨骼肌肌肉萎缩蛋白包括肌环指蛋白1 (muscle-specific RING finger protein 1,MuRf-1)和肌萎缩素1 (muscle atrophy F-box,MAFbx，又称Atrogin-1)的表达量，并采用免疫组织化学染色法检测脑内星形胶质细胞激活相关蛋白即胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的表达量，以反映各系统的病理生理学功能变化。结果 后肢去负荷造模后，实验组小型猪体重显著下降（P0.001），血容量也显著下降（P0.01）。实验期间，实验组小型猪的血红蛋白、红细胞比容和红细胞计数水平显著降低（P0.05），随后逐渐恢复；丙氨酸氨基转移酶和γ-谷氨酰转移酶表达水平呈现先下降（P0.05）后回升的趋势，白蛋白水平显著下降（P0.001），球蛋白水平显著上升（P0.01），肌酐水平显著下降（P0.05）。实验组小型猪腓肠肌的平均肌纤维直径显著缩短（P0.05），肌纤维直径分布左移，小直径肌纤维增多；同时腓肠肌、椎旁肌肉Atrogin-1的表达水平显著增加（P0.05）。这些变化与航天失重对人和动物的影响基本一致。此外，实验组小型猪的脑皮质顶叶、额叶和海马区域部分神经元变性，小脑区域浦肯野细胞数量轻度减少，而海马区的GFAP阳性信号显著增强（P0.05）。结论 -20°角后肢去负荷30 d的小型猪可作为一种新的模拟失重动物模型，用于航空航天领域相关研究。