血清凝集、基因测序联合检测群霍乱弧菌的应用
Application of DetectingVibrio Cholerae Combined with Serum Agglutination and Gene Sequencing作者机构:安康市疾病预防控制中心生物检验科陕西安康725000 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206 安康市人民医院检验科陕西安康725000
出 版 物:《现代检验医学杂志》 (Journal of Modern Laboratory Medicine)
年 卷 期:2015年第30卷第2期
页 面:84-86页
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 071007[理学-遗传学] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
摘 要:目的:避免霍乱弧菌检测假阳性,提高检测正确率。方法随机选取2013年1~7月,全国各省市 CDC 送往中国CDC 霍乱初筛阳性菌株14株;用 LB 营养琼脂培养12 h,挑取单菌落进行霍乱弧菌血清凝集,同时水煮模板法提取菌株的DNA。针对弧菌属16SrDNA 序列设计引物,进行弧菌16SrDNA PCR 检测,电泳观察16SrDNA 产物,将16SrDNA 阳性产物送测序公司测序,测序结果在 NCBI 网站上进行 Blast 比对,分析比较血清凝集和 Blast 比对结果。结果共选取14株菌进行实验,血清凝集阳性12株,2株未凝。经弧菌16SrDNA 扩增,电泳观察14株菌均扩增出相应的片段,说明所选菌株均为弧菌属。将14株菌的16SrDNA 阳性产物测序,并将测序结果进行 Blast 比对:2株血清未凝集菌均是哈维氏弧菌;12株血清凝集阳性的菌中,1株是需钠弧菌,其余11株是霍乱弧菌。结论血清凝集和基因测序联合检测群霍乱弧菌,可避免霍乱弧菌检测假阳性,提高检测正确率。