外源人gp96基因在肿瘤细胞中的高效表达

作     者：岳培彬 杨树德 黄常志 赵玫 杜菲 林梁 余权 周启兵 

作者机构：北京医院卫生部临床检验中心北京100730 中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所北京100021 

出 版 物：《癌症》 (Chinese Journal of Cancer)

年 卷 期：2002年第21卷第2期

页      面：142-145页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学研究基金(39770824) 

主　　题：热休克蛋白 gp96 基因表达 抗肿瘤免疫 疫苗 免疫应答 

摘      要：背景与目的:从肿瘤细胞中分离出的热休克蛋白gp96制备物免疫小鼠可产生抗相应肿瘤的特异性保护性细胞毒性T细胞免疫应答,为肿瘤免疫治疗开辟了一条新的可行性途径。但通常gp96在细胞中的表达水平较低,从有限的细胞或组织中获得的gp96制备物难以满足研究的需要。因此,本研究拟为制备高质量和充足的gp96而建立高表达gp96的单克隆细胞株。方法:构建人gp96cDNA的重组表达质粒pcDNA-hgp96并将其转染HeLa细胞,G418筛选稳定转染的阳性细胞克隆,然后用Western印迹分析单克隆细胞株的gp96表达量。结果:成功构建了人gp96的重组表达质粒,建立了稳定转染的单克隆细胞株,并筛选出一株高表达gp96的单克隆细胞。结论:成功建立了高表达gp96的单克隆细胞株,为gp96抗肿瘤免疫的研究奠定了基础。