miR-125b通过靶向抑制Smad4调控骨髓间充质干细胞成骨分化

作     者：陆细红 邓敏 贺洪辉 曾德辉 张卫 LU Xihong;DENG Min;HE Honghui;ZENG Dehui;ZHANG Wei

作者机构：南华大学附属南华医院骨科湖南衡阳421002 广州医学院附属肿瘤医院肿瘤研究所广州510183 

出 版 物：《中南大学学报（医学版）》 (Journal of Central South University ：Medical Science)

年 卷 期：2013年第38卷第4期

页      面：341-346页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81101526)~~ 

主　　题：miR-125b 间充质干细胞 成骨分化 Smad4 

摘      要：目的:研究miR-125b是否通过调控其预测的靶基因Smad4表达而调节骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化。方法:构建Smad4 3 -UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告检测观察miR-125b对Smad4 3 -UTR-荧光素酶活性的影响;分离培养人骨髓MSCs,在MSCs中转染miR-125b mimics并进行成骨诱导,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹检测Smad4表达水平;Smad4 siRNA转染MSCs并进行成骨诱导,通过检测碱性磷酸酶(AKP)活性及RUNX2 mRNA表达水平变化考察Smad4下调对MSCs成骨分化的影响。结果:双荧光素报告检测显示miR-125b能特异性地与Smad4 mRNA的3 -UTR结合,抑制其荧光素酶活性(P0.05)。过表达miR-125b能抑制MSCs成骨分化过程中Smad4表达水平。干扰Smad4表达能抑制AKP活性及RUNX2 mRNA表达水平,它能部分模拟miR-125b调控MSCs成骨分化的功能。结论:miR-125b通过抑制靶基因Smad4的表达调控MSCs成骨分化。