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P^(53)、mdm2和neo基因探针的制备与应用

作     者:饶国洲 

作者机构:第四军医大学西京医院西安710032 

出 版 物:《陕西医学杂志》 (Shaanxi Medical Journal)

年 卷 期:1999年第28卷第11期

页      面:680-681页

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主  题:肿瘤 p53 mdm2 基因探针 neo 地高辛标记探针 

摘      要:为研究P^(53),mdm2基因在肿瘤细胞中的表达与调控作用,将克隆于质粒载体中的P^(53),mdm2和neo基因分别用双酶切得到P^(53),mdm2,cDNA和neo基因片段,采用地高辛随机引物法标记探针,用于转染含P^(53)和mdm2基因的肺腺癌GLC-82细胞中DNA和RNA斑点杂交,以及肿瘤细胞中P^(53)和mdm2基因的检测。结果显示,以neo基因为探针的DNA斑点杂交中转染P^(53)和mdm2的细胞出现阳性信号,GLC-82亲本细胞为阴性,表明转染成功。以P^(53),mdm2,cDNA为探针的RNA斑点杂交中转染P^(53)和mdm2的细胞出现阳性信号,提示P^(53)和mdm2在细胞中获得表达。地高辛标记探针具有简单、快速、特异性强、灵敏度高、无污染等特点,有推广应用价值。

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