药物外排泵基因表达与结核分枝杆菌耐药关系的探讨

作     者：李桂莲 王撷秀 谢彤 巨韩芳 赵慧 穆成 赵德福 LI Gui-lian;WANG Xie-xiu;XIE Tong;JU Han-fang;ZHAO Hui;MU Cheng;ZHAO De-fu

作者机构：天津市结核病控制中心参比实验室300041 

出 版 物：《中华检验医学杂志》 (Chinese Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期：2011年第34卷第7期

页      面：605-611页

核心收录：

学科分类：100208[医学-临床检验诊断学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：基金项目：国家十一五艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治项目（2008ZX10003-09） 

主　　题：分枝杆菌 结核 抗药性 多种 细菌 细菌蛋白质类 膜转运蛋白质类 ATP结合匣式转运子 突变 

摘      要：目的 探讨MTB药物外排泵基因的表达与耐药表型、耐药相关基因突变型的关系.方法 从2007年天津市结核病控制中心参比室库存菌株中选择对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇联合或单一耐药的全部耐药MTB菌株45株及对以上4种药物全敏感的MTB菌株26株（全敏组）.采用直接测序法检测异烟肼耐药相关基因katG、inhA、oxyR-ahpC、ndh,利福平耐药相关基因rpoB,链霉素耐药相关基因rpsL、rrs和乙胺丁醇耐药相关基因embB、embC、embA的突变情况.提取菌株RNA后逆转录并采用real-time PCR方法检测药物外排泵基因Rv1410c、Rv2136c、Rv0783c和Rv1819c的表达量,并用方差分析和t检验的方法分析药物外排泵基因表达量在不同菌株耐药表型、耐药相关基因突变型菌株中的差异.结果 Rv1410c表达量在耐链霉素组[（8.48±6.33）×10-5],耐异烟肼组[（8.43±6.38）×10-5],耐利福平组[（9.59±7.27）×10-5],耐多药组[（10.37±7.86）×10-5],耐异烟肼＋链霉素组[（9.39±6.81）×10-5],均高于全敏组表达量[（5.67±3.29）×10-5],差异有统计学意义（t′值分别为2.18、2.20、2.29、2.34、2.43,P均〈0.05）.Rv2136c表达量在耐异烟肼组[（3.51±2.43）×10-5],耐多药组[（4.21±2.94）×10-5],耐异烟肼＋链霉素组[（3.81±2.46）×10-5]均高于全敏组表达量[（2.50±1.44）×10-5],差异有统计学意义（t′值分别为2.03、2.22、2.28,P均〈0.05）.rpoB 531突变型菌株Rv0783c的表达量[（5.41±3.03）×10-6]高于野生型耐利福平菌株[（2.29±1.62）×10-6],差异有统计学意义（t′=2.81,P〈0.05）.结论 Rv1410c和Rv2136c表达量高低与MTB对多种药物耐药有关,Rv0783c的高表达与利福平耐药株rpoB 531位密码子突变可能相关.