利用转座质粒plasposon构建荧光标记的脱色希瓦氏菌S12

作     者：李光飞 邓代永 许枚英 岑英华 孙国萍 LI Guang-Fei;DENG Dai-Yong;XU Mei-Ying;CEN Ying-Hua;SUN Guo-Ping

作者机构：中国科学院武汉病毒研究所武汉430071 

出 版 物：《微生物学通报》 (Microbiology China)

年 卷 期：2007年第34卷第6期

页      面：1174-1178页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30670020) 国家高技术研究发展计划(863)项目(No.2006AA06Z322) 广东省科技攻关项目(No.2004A30404002) 

主　　题：荧光蛋白 脱色希瓦氏菌S12 Plasposon 

摘      要：采用分子生物学手段将具有转座功能的自杀性质粒pTnMod-okm与荧光蛋白基因eyfp构建重组质粒pTE-okm。pTE-okm通过结合转移进入脱色希瓦氏菌S12中,质粒上的转座子元件转座到S12的染色体上,而质粒本身的窄宿主复制位点使其在S12中不能得到有效的复制而自杀。荧光显微镜下筛选表达荧光蛋白的脱色希瓦氏菌克隆,通过对其提取质粒确定pTE-okm已经在脱色希瓦氏菌中自杀。筛选得到生长速度未发生延迟、脱色能力不受影响的荧光标记菌株S12-40。标记的脱色希瓦氏菌在无抗生素压力的情况下培养,传代20次(8h/次)后在荧光显微镜下依然查看到荧光蛋白的表达。该菌株的构建为研究其生态学行为奠定了基础。