两种实验方法检测乙型肝炎病毒前C区A1896变异的比较研究

作     者：刘悦晖 丁静娟 LIU Yue-hui;DING Jing-juan

作者机构：贵阳医学院附属医院感染科贵州550004 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2007年第21卷第1期

页      面：70-72页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主　　题：肝炎病毒,乙型 变异(遗传学) 限制性片段长度多态性 序列分析 

摘      要：目的 建立错配PCR-限制性片段长度多态性（mPCR-RFLP）检测乙型肝炎病毒（HBV）前C区A1896变异的方法，与直接测序法比较，评估其应用价值。方法 利用错配PCR的原理扩增HBV前C区长194bp的基因片段，扩增产物经限制性内切酶Bsu36Ⅰ酶切，琼脂糖凝胶电泳，根据酶切图谱多态性，建立检测HBV前CA1896变异的方法，对134份乙肝患者血清进行分析，酶切同时测序。2份标本用克隆测序以验证酶切鉴定变异株、野株混合感染的准确性。结果 134份血清中117（87．31％）份能用酶切、109（81．34％）份能用测序成功分析HBV前CA1896状况。酶切与测序均成功的101份血清中，54份为前C区A1896变异株，47份为前C区G1896野株，酶切与测序的结果完全一致。1份酶切鉴定为单纯前C区A1896变异株的5个克隆子均为前C区A1896变异株；1份酶切鉴定为混合感染标本的5个克隆子中，1个为前C区A1896变异株，另外4个为前C区G1896野株。酶切分析结果与克隆测序结果完全相符。结论 与测序法相比，本方法简便、特异性强，能鉴定混合感染，适合大样本分析，可用于临床及流行病学调查。