结核分枝杆菌热休克蛋白60编码基因的克隆与原核表达

作     者：姚炜 范雄林 王芳 胡松 黄汉菊 Yao Wei;Fan Xionglin;Wang Fang;Hu Song;Huang Hanju

作者机构：华中科技大学同济医学院微生物教研室武汉430030 

出 版 物：《华中医学杂志》 (Central China Medical Journal)

年 卷 期：2006年第30卷第6期

页      面：521-522页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主　　题：结核样杆菌 热休克蛋白质类 基因 

摘      要：目的克隆结核分枝杆菌热休克蛋白60(Hsp60)编码基因,并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR技术从结核杆菌H37Rv株中扩增hsp60基因,并将其与pZero-T载体连接,进行DNA测序。将得到的hsp60基因亚克隆到表达载体pProEXHTb中,构建重组原核表达质粒pProEXHTb-TBhsp60,并在大肠杆菌BL21中诱导表达。结果成功地克隆了结核分枝杆菌hsp60基因。DNA测序证实,与GenBank公布的序列一致。含pProEXHTb-TBhsp60基因表达质粒的大肠杆菌经IPTG诱导后,能够高效表达相对分子质量(KD)约为60KD的融合蛋白。结论获得了结核分枝杆菌hsp60基因,成功地构建了原核表达质粒pProEXHTb-TBhsp60,并在大肠杆菌得到表达,为研究其免疫学特性奠定了基础。