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HBV(ayw)转基因小鼠HBV复制中间体的检测

Detection of HBV replicated intermediates in the liver of HBV(ayw) transgenic mice

作     者:陈阳述 尤玉琴 苏蔚 易学瑞 袁有成 陈文吟 张锋 孔祥平 CHEN Yang-shu;YOU Yu-qin;SU Wei;YI Xue-rui;YUAN You-cheng;CHEN Wen-yin;ZHANG Feng;KONG Xiang-ping

作者机构:解放军458医院全军肝病中心、全军转基因动物重点实验室广州510600 

出 版 物:《解放军医学杂志》 (Medical Journal of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期:2011年第36卷第9期

页      面:959-961页

核心收录:

学科分类:1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基  金:“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项“十一五”课题(2008ZX10002-011) 

主  题:小鼠,转基因 肝炎病毒,乙型 双杂交系统技术 

摘      要:目的建立稳定、高灵敏度化学发光Southern blotting检测系统,检测HBV(ayw)转基因小鼠肝脏及其他组织的HBV复制水平。方法采用地高辛标记HBV探针,利用pTHBV1047质粒检测杂交系统的灵敏度及重复性;提取第27代HBV(ayw)转基因小鼠肝、肾、脾和肌肉组织总DNA,经HindⅢ酶切后电泳、转膜,利用高灵敏度化学发光杂交Southern blotting检测各组织中HBV复制中间体的水平。结果地高辛标记的化学发光检测系统灵敏度达0.1pg,且杂交系统稳定可靠。HBV(ayw)转基因小鼠基因组DNA中检测到整合的外源HBV DNA,但低于HepG2.2.15细胞的HBV复制水平。肝、肾、脾和肌肉组织中都有HBV复制中间体存在,以肝组织中含量最高。结论第27代HBV(ayw)转基因小鼠染色体含有稳定的HBV基因整合,为复制型HBV转基因小鼠。

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