资癸益冲方通过糖酵解代谢途径对小鼠早发性卵巢功能不全的影响

作     者：张新苗 刘雪平 郗红燕 唐思玲 李荣霞 吴忠玉 段彦苍 ZHANG Xinmiao;LIU Xueping;XI Hongyan;TANG Siling;LI Rongxia;WU Zhongyu;DUAN Yancang

作者机构：河北中医药大学研究生学院石家庄050091 河北省中西医结合生殖疾病协同创新中心石家庄050091 河北中西医结合肝肾病证研究重点实验室石家庄050091 

出 版 物：《中国药房》 (China Pharmacy)

年 卷 期：2024年第35卷第20期

页      面：2460-2465页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：河北省自然科学基金项目(No.H2023423023) 河北中医学院研究生创新资助项目(No.CXZZBS2023141) 河北中医学院优秀创新团队项目(No.YXTD2022003) 

主　　题：早发性卵巢功能不全 资癸益冲方 糖酵解 卵巢颗粒细胞 细胞凋亡 

摘      要：目的研究资癸益冲方调控糖酵解代谢途径对小鼠早发性卵巢功能不全(POI)的影响。方法将80只SPF级C57BL/6N雌性小鼠分为正常组、模型组、资癸益冲方组(14.175 g/kg)、资癸益冲方+2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)组(资癸益冲方14.175 g/kg+糖酵解抑制剂2-DG 100 mg/kg),每组20只。除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺建立POI模型,造模成功后,各组小鼠给予相应药物。通过苏木精-伊红染色观察小鼠卵巢组织病理形态学变化及各级卵泡数量;采用放射免疫法检测小鼠血清中雌二醇(E2)、血清抗米勒管激素(AMH)、卵泡刺激素(FSH)水平;TUNEL法检测小鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况;比色法检测小鼠卵巢组织中己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;Western blot法、实时荧光定量聚合酶链式反应检测小鼠卵巢组织中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)、HK2、M2型PK(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)蛋白及mRNA的表达。结果与模型组比较,资癸益冲方组小鼠卵巢组织中原始卵泡、生长卵泡、窦卵泡数和卵巢颗粒细胞层数均显著增加(P0.05),卵巢颗粒细胞排列整齐,闭锁卵泡数量、卵巢颗粒细胞凋亡数量均显著减少(P0.05);血清中E2、AMH水平,卵巢组织中HK、PK、LDH活性,Bcl-2、HK2、PKM2、LDHA蛋白及mRNA表达量均显著升高(P0.05);血清中FSH水平,卵巢组织中Bax、caspase-3蛋白及m RNA表达量和Bax/Bcl-2比值均显著降低(P0.05)。2-DG可逆转资癸益冲方对POI模型小鼠上述指标的改善作用。结论资癸益冲方可通过促进糖酵解来减少POI模型小鼠卵巢颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁,改善卵巢储备功能。