绵羊肺源大肠杆菌cyaA基因的分子特征及抗原性分析

作     者：操义恒 贾开文 党士荣 胡亚辉 王巧梅 俞杰 郭云霞 周霞 黄新 钟发钢 韩猛立 吴桐忠 张倩 

作者机构：石河子大学动物科技学院 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所 

出 版 物：《江苏农业科学》 (Jiangsu Agricultural Sciences)

年 卷 期：2024年第17期

页      面：58-64页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：新疆生产建设兵团重点领域科技攻关计划(编号:2021AB012、2019AB029) 

主　　题：绵羊肺源大肠杆菌 cyaA基因 分子特征 抗原性 遗传进化 

摘      要：为研究绵羊肺源大肠杆菌cyaA基因的分子特征、抗原性及其遗传进化关系，采用PCR技术对绵羊肺源大肠杆菌XJ10菌株的cyaA基因进行扩增、克隆并测序，应用定量PCR检测cyaA基因在不同培养阶段的mRNA表达量，利用在线软件对其进行编码蛋白分子特征、抗原性及其遗传进化分析。结果显示，cyaA基因全长2 547 bp,编码848个氨基酸；cyaA基因在细菌对数期的mRNA表达量最高，其次是稳定期及迟缓期，在衰亡期的mRNA表达量最低；氨基酸序列分析发现，分子式为C4 389H6 759N1 193O1 273S30,理论分子质量为97.57 ku,理论等电点为5.82,为酸性亲水性蛋白，稳定性较低；二级结构中α-螺旋、无规则卷曲、延伸链和β-折叠所占比例分别为42.81%、39.03%、14.27%和3.89%。AC蛋白无信号肽与跨膜区，保守结构域位于1～848位氨基酸，属于腺苷酸环化酶超家族，具有14个开放阅读框，存在81个磷酸化位点。AC蛋白B细胞优势表位共16个，分别位于第44～51、61～65、248～250、259～267、296～304、355～366、436～439、456～456、476～481、489～490、540～559、589～597、634～640、717～722、766～773、806～806区段；遗传进化分析发现大肠杆菌XJ10菌株AC蛋白与志贺氏菌AC蛋白相似性最高。本试验结果为进一步研究大肠杆菌AC蛋白的功能及其作为大肠杆菌疫苗候选抗原奠定了基础。