EGCG通过Nrf2/ARE信号通路改善鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的研究

作     者：杨涪 刘旭 

作者机构：青岛市第八人民医院药学部 中国人民解放军海军第九七一医院药剂科 

出 版 物：《中国临床药理学杂志》 (The Chinese Journal of Clinical Pharmacology)

年 卷 期：2024年第20期

页      面：2983-2987页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：山东省医药卫生科技发展计划基金资助项目(2016ws0727 202013050382) 

主　　题：表没食子儿茶素没食子酸酯 鱼藤酮 氧化应激 核转录因子红细胞系-2p45相关因子2/抗氧化反应元件信号通路 

摘      要：目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用并探讨可能的机制。方法 将SH-SH5Y细胞分为对照组（正常培养细胞）、模型组（鱼藤酮诱导的氧化损伤模型）和低、中、高剂量实验组(分别给予10、20、40μmol·L-1EGCG)。用小干扰RNA（siRNA）干扰细胞核转录因子红细胞系-2p45相关因子2（Nrf2）表达，将干扰后细胞分为si-对照组（细胞正常培养）、si-模型组（鱼藤酮诱导的氧化损伤模型）、si-低剂量实验组、si-中剂量实验组(分别给予10、20μmol·L-1EGCG)。用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞存活率；用乳酸脱氢酶（LDH）法检测细胞损伤情况；用还原型辅酶Ⅱ法检测总谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性；用硫代巴比妥酸法检测丙二醛（MDA）活性；用荧光探针法检测活性氧（ROS）水平；用蛋白质印迹法检测Nrf2、酪氨酸羧化酶（TH）蛋白表达水平。结果 对照组、模型组和低、中、高剂量实验组细胞存活率分别为（100.00±1.86）%、（45.33±4.25）%、（74.21±4.54）%、（80.30±3.62）%和（70.12±4.61）%;LDH水平分别为（100.00±3.67）、（222.56±11.46）、（125.57±20.52）、（129.60±6.29）和（149.51±11.99）U·L-1;ROS相对荧光强度分别为1.00±0.00、1.78±0.16、1.48±0.15、1.13±0.09和1.11±0.13;MDA活性分别为（2.11±0.34）、（6.39±0.55）、（4.84±0.36）、（3.96±0.46）和（4.43±0.43）nmol·mg-1;GPx活性分别为（668.80±32.79）、（533.03±57.72）、（718.30±73.78）、（735.03±87.25）和（797.98±66.76）mU·mg-1;TH蛋白相对表达水平分别为0.33±0.04、0.21±0.03、0.30±0.01、0.31±0.03和0.27±0.01;模型组上述指标与对照组比较，高剂量实验组上述指标与模型组比较，在统计学上差异均有统计学意义（P0.05,P0.01）。对照组、模型组和低、中、高剂量实验组Nrf2蛋白表达水平分别为0.26±0.07、0.28±0.02、0.39±0.05、0.54±0.09和0.53±0.02,低、中、高剂量实验组与模型组比较，在统计学上差异均有统计学意义（P0.05,P0.01）。si-对照组、si-模型组和si-低剂量实验组、si-中剂量实验组的细胞存活率分别为（100.00±5.73）%、（50.69±5.48）%、（61.95±8.15）%和（60.59±9.07）%;ROS相对荧光强度分别为1.00±0.05、1.48±0.10、1.30±0.15和1.28±0.22。si-模型组与si-对照组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P0.05）。结论 EGCG可能通过Nrf2/ARE信号通路对鱼藤酮所致SH-SY5Y细胞氧化损伤发挥保护作用。