miR-190对缺氧神经元自噬、程序性死亡及AMPK信号转导的作用机制

作     者：林雪娟 陈丽君 李鸽 邢艺 陈浩 

作者机构：海南医学院第一附属医院神经内科 

出 版 物：《中国老年学杂志》 (Chinese Journal of Gerontology)

年 卷 期：2024年第20期

页      面：5045-5049页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

基　　金：海南省自然科学青年基金项目(No.819QN370) 

主　　题：miR-190 缺氧神经元 自噬 程序性死亡 腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)信号转导 

摘      要：目的 研究miR-190对缺氧神经元自噬、程序性死亡及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)信号转导的作用机制。方法 人大脑原代皮层神经元HCN建立缺氧损伤模型后，随机分为对照组、miR-190-NC组(转染miR-190不相关序列)、miR-190 mimic组(转染miR-190模拟物组)、miR-190 siRNA组(转染miR-190抑制物组)。另设立自噬抑制剂组、AMPK抑制剂组、miR-190 mimic+自噬抑制剂组、miR-190 mimic+AMPK抑制剂组、miR-190 siRNA+自噬抑制剂组、miR-190 siRNA+AMPK抑制剂组，用于Western印迹实验。运用qRT-聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR-190及程序性死亡相关指标受体相互作用蛋白激酶(RIPK)3、混合系列蛋白激酶样结合域(MLKL)水平表达，CCK-8测神经元细胞活力，流式细胞仪检测神经元凋亡，Western印迹检测各组自噬相关蛋白微管关联蛋白轻链(LC)3Ⅱ及AMPK通路相关蛋白AMPK、p-AMPK、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR蛋白表达。结果 与对照组相比，miR-190 mimic组LC3Ⅱ、AMPK、p-AMPK、miR-190表达升高，mTOR、p-mTOR、RIPK3、MLKL表达降低，差异有统计学意义(P0.05);miR-190 siRNA组LC3Ⅱ、AMPK、p-AMPK、miR-190表达降低，mTOR、p-mTOR、RIPK3、MLKL水平升高，差异有统计学意义(P0.05);自噬抑制剂组与AMPK抑制剂组LC3Ⅱ、AMPK、p-AMPK表达降低，mTOR、p-mTOR表达升高，差异有统计学意义(P0.05)。与miR-190-NC组相比，miR-190-mimic组神经元细胞活性明显升高(P0.05);与miR-190-mimic组相比，miR-190-siRNA组miR-190及神经元细胞活性明显降低(P0.05)。与miR-190 siRNA组相比，miR-190 siRNA+自噬抑制剂组与miR-190 siRNA+AMPK抑制剂组LC3Ⅱ、AMPK、p-AMPK表达明显降低，mTOR、p-mTOR表达明显升高(P0.05)。结论 转染miR-190 mimic后可通过调控AMPK通路激活缺氧神经元自噬，减少神经元程序性死亡及凋亡，促进神经元活性增加，从而发挥神经元保护作用。