莲心碱通过抑制细胞自噬减轻体外胰腺腺泡细胞急性炎症反应

作     者：惠博 张健 李韧 周蕊 杨正安 HUI Bo;ZHANG Jian;LI Ren;ZHOU Rui;YANG Zheng′an

作者机构：西安交通大学第二附属医院干四病区西安710004 

出 版 物：《山西医科大学学报》 (Journal of Shanxi Medical University)

年 卷 期：2024年第55卷第8期

页      面：1001-1007页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：陕西省社会发展科技攻关项目(2016SF-042) 

主　　题：急性胰腺炎 胰腺腺泡细胞 细胞自噬 莲心碱 炎症反应 细胞损伤 细胞凋亡 

摘      要：目的探讨莲心碱(liensinine,LSN)对雨蛙素诱导的急性胰腺炎细胞模型的保护作用及其分子机制。方法胰腺腺泡细胞AR42J分为对照组、模型组、20μmol/L LSN组和40μmol/L LSN组。模型组加入雨蛙素刺激造模;20μmol/L LSN组和40μmol/L LSN组加入LSN预处理12 h,再加入雨蛙素刺激造模。采用Western blot检测LC3、Beclin-1和p62蛋白表达水平,采用ELISA法检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平,采用淀粉酶活性检测试剂盒检测淀粉酶含量,采用Calcein AM细胞活性检测试剂盒检测细胞存活率,采用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)细胞毒性检测试剂盒检测细胞损伤,采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果与对照组比较,模型组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率和Beclin-1蛋白水平显著升高(P0.01),而p62蛋白水平显著降低(P0.01);与模型组比较,20μmol/L LSN组和40μmol/L LSN组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率和Beclin-1蛋白水平显著降低(P0.05),而p62蛋白水平显著升高(P0.05);与20μmol/L LSN组比较,40μmol/L LSN组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率和Beclin-1蛋白水平显著减少(P0.05),而p62蛋白水平显著增加(P0.05)。与对照组比较,模型组IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平显著增加(P0.01),淀粉酶活性显著升高(P0.01),细胞存活率显著降低(P0.01),LDH活性显著升高(P0.01),细胞凋亡率显著增加(P0.01);与模型组比较,20μmol/L LSN组和40μmol/L LSN组IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平显著降低(P0.05),淀粉酶活性显著下降(P0.05),细胞存活率显著升高(P0.05),LDH活性显著降低(P0.05),细胞凋亡率显著下降(P0.05);与20μmol/L LSN组比较,40μmol/L LSN组IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平显著减少(P0.05),淀粉酶活性显著降低(P0.05),细胞存活率显著提高(P0.05),LDH活性显著下降(P0.05),细胞凋亡率显著降低(P0.05)。结论莲心碱可有效保护雨蛙素诱导的胰腺腺泡细胞损伤,其作用机制可能与抑制细胞自噬相关。