PDLSC-Exo对牙周膜干细胞迁移和成纤维分化的作用研究

作     者：张宁 胡月 时小婷 曹楠珏 刘克达 孟圆 王蔚 

作者机构：中国医科大学附属口腔医院综合科 辽宁省口腔疾病重点实验室 

出 版 物：《海南医学院学报》 (Journal of Hainan Medical University)

年 卷 期：2024年

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82271037) 辽宁省科学技术计划项目(2022-BS-123) 沈阳市科技计划项目(2400023067,21-173-9-34) 

主　　题：牙周膜干细胞 外泌体 成纤维分化 细胞迁移 

摘      要：目的：探究牙周膜干细胞来源外泌体（exosomes derived from periodontal ligament stem cells，PDLSC-Exo）对牙周膜干细胞迁移和成纤维分化的作用。方法：酶消化法提取PDLSCs；超速离心法提取PDLSC-Exo，应用透射电镜、纳米颗粒示踪和western blot进行鉴定；PDLSCs经20 μg/mL PDLSC-Exo处理后，MTT和Annexin V-FITC/PI双染法分别检测细胞活力和细胞凋亡水平，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，qRT-PCR检测细胞成纤维分化能力，western blot检测PDLSCs中转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）/SMAD3信号水平；细胞划痕实验检测抑制SMAD3磷酸化后，PDLSC-Exo对细胞迁移的影响。结果：PDLSCs光镜下呈长梭形贴壁生长，具有成骨和成脂向分化能力，阳性表达间充质干细胞表面标记物CD73、CD90和CD105，不表达造血干细胞表面标记物CD31和CD45；PDLSC-Exo透射电镜下呈杯状囊泡结构，直径为30 nm～150 nm，阳性表达外泌体特异性标记蛋白Alix和CD63，不表达细胞内质网特异性蛋白Calnexin；PDLSC-Exo处理组中PDLSCs细胞活性升高，细胞凋亡呈下降趋势，成纤维相关基因COL1和FAP表达增加，细胞划痕愈合率呈增加趋势，TGF-β经典信号P-SMAD2/3水平上调；SMAD3磷酸化抑制后，下调了PDLSC-Exo促进的PDLSCs细胞迁移能力。结论：PDLSC-Exo可能通过TGF-β/SMAD3信号通路促进牙周膜干细胞迁移和成纤维分化能力。