miR-124通过调控早期生长反应因子1对紫杉醇致神经病理性疼痛的机制研究

作     者：王文康 李恒昌 李湘莲 冯杜杭 张汉裕 张庆文 朱瑞燕 侯春玲 WANG Wen-kang;LI Heng-chang;LI Xiang-lian;FENG Du-hang;ZHANG Han-yu;ZHANG Qing-wen;ZHU Rui-yan;HOU Chun-ling

作者机构：广州市白云区第二人民医院麻醉科广东510450 广州市第一人民医院麻醉科 

出 版 物：《环境与健康杂志》 (Journal of Environment and Health)

年 卷 期：2024年第41卷第9期

页      面：768-776,F0003页

学科分类：07[理学] 0713[理学-生态学] 

基　　金：广州市卫生健康科技一般引导项目(20231A010009) 

主　　题：微小RNA-124 早期生长反应因子1 紫杉醇 神经病理性疼痛 小胶质细胞的表型转换 

摘      要：目的探讨微小RNA-124(microRNA-124,miR-124)的表达对紫杉醇诱导的神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)的影响机制,以及其对早期生长反应因子1(early growth response 1,EGR1)的调控机制。方法将P12细胞分别暴露于0μmol/L(对照)、0.5μmol/L、1μmol/L、2μmol/L的紫杉醇溶液培养48 h;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)PCR实验、双荧光素酶实验以及蛋白质免疫共沉淀实验检测miR-124和EGR1的mRNA的表达以及两者之间的关系。将50只8~10周龄SD雄性大鼠分别在第1天、第3天、第5天、第7天腹腔注射2 mg/kg的紫杉醇,构建大鼠NPP模型;将大鼠随机分为假手术组、模型组、对照(agomiR-124-NC+pcDNA3.1-EGR1-NC)组、激动剂(agomiR-124)组、过表达(pcDNA3.1-EGR1)组,每组10只;其中,假手术组大鼠在造模过程中腹腔注射等剂量的生理盐水;在造模成功后,对照组大鼠尾静脉注射agomiR-124-NC+pcDNA3.1-EGR1-NC;激动剂组大鼠尾静脉注射agomiR-124+pcDNA3.1-EGR1;过表达组大鼠尾静脉注射agomiR-124+pcDNA3.1-EGR1,每日注射一次,连续注射14 d。测定大鼠的械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL);末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)缺口末端标记(TdT-mediated dUTPnick end labelling,TUNEL)染色检测脊髓组织中神经元的细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-4和IL-10的水平;免疫荧光检测脊髓组织中小胶质细胞的表型转换;采用Western blot法检测各组脊髓组织中EGR1蛋白的表达。结果在紫杉醇诱导的P12细胞损伤模型中,miR-124的表达明显降低(均P0.05)。结论在紫杉醇诱导的神经病理性疼痛模型中,miR-124的表达明显降低,EGR1 mRNA的表达明显升高,miR-124靶向EGR1的表达,过表达miR-124后能明显促进脊髓组织中小胶质细胞向M2型转换,降低神经元的细胞凋亡率,减轻动物脊髓组织的病理损伤,缓解其疼痛。