2M型VWD突变通过不同机制减弱VWF与血小板的结合

作     者：方金花 吴芝伟 杨俊贤 方颖 吴建华 林蒋国 

作者机构：广东省人民医院医学研究部 华南理工大学生物科学与工程学院 

出 版 物：《医用生物力学》 (Journal of Medical Biomechanics)

年 卷 期：2024年第S1期

页      面：403-403页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目,32071303,31771012,12302400 广东省自然科学基金项目,2023A1515012606 

摘      要：目的 血管性血友病因子(VWF)招募血小板是形成血栓的关键步骤,受VWF-A1与A2互作的调节。VWF的功能异常会引起血管性血友病(VWD),但A1/A2互作在VWD中对血小板黏附的调节作用尚未明确。方法 采用分子动力学模拟探究VWF-A1与A2互作的结合界面,并研究位于该界面上的2M型VWD突变如何影响A1/A2互作,同时使用原子力显微镜在单分子层面进行验证;此外,还利用流动腔技术研究了2M型VWD突变对A1及A1A2双体在流动环境中招募血小板的能力。结果 在A1/A2结合界面发现了8种2M型VWD突变,其中S1358N、E1359K、V1360A、K1362T和Y1363C突变显著增强了A1/A2的互作,而L1361W、L1365R和F1369I突变对A1/A2的互作无明显影响。原子力显微镜的单分子力谱实验也证实了这些2M型突变对A1/A2互作具有不同的影响。除了E1359K突变在招募血小板能力上与野生型A1相当外,其他7种突变都表现出不同程度的减弱效果。在A1A2双体招募血小板的实验中,所有2M型突变都显示出减弱血小板黏附的趋势。结论2M型VWD突变可能通过两种不同的机制影响血小板招募:一种是突变直接改变VWF-A1招募血小板的能力,另一种是突变通过促进自抑制的A1/A2互作来削弱对血小板的招募,例如E1359K突变。