抗除草剂转基因作物实时荧光定量PCR检测

作     者：王恒波 陈如凯 陈平华 WANG Hengbo;CHEN Rukai;CHEN Pinghua

作者机构：福建农林大学农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室福州350002 

出 版 物：《应用与环境生物学报》 (Chinese Journal of Applied and Environmental Biology)

年 卷 期：2009年第15卷第6期

页      面：866-870页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 0828[工学-农业工程] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家"863"计划项目(No.2007AA100701) 福建省科技计划重点项目(No.2007I0036)资助 

主　　题：抗除草剂转基因作物 SYBR GreenⅠ荧光染料 实时荧光定量PCR 溶解曲线 检测 

摘      要：建立了一种以SYBR Green Ⅰ为结合染料、快速准确检测转抗除草剂基因成分的实时荧光定量PCR方法.以转基因大豆与转基因玉米标准品为材料,通过使用特异性引物和SYBR Green I结合染料实时荧光定量PCR技术,对转基因农作物中外源抗除草剂基因进行了定量检测,绘制了两种基因扩增的标准曲线图,根据标准曲线方程计算外源基因含量;并作了溶解曲线、检测方法检测灵敏度和精密度的分析.研究发现,两者标准曲线方程线性关系良好,R2值分别达到0.9939与0.9924.通过已知标准品进行验证,实测值与真值接近,与实际含量的相对偏差是6.52%和7.90%.结果表明,SYBR Green I结合染料法完全可以用于转基因农作物定量PCR检测.