Sirt1对创伤弧菌脓毒症中巨噬细胞凋亡的影响及机制

作     者：周慧男 吴成林 刘剑飞 张陈 周丽君 钦可为 ZHOU Huinan;WU Chenglin;LIU Jianfei;ZHANG Chen;ZHOU Lijun;QIN Kewei

作者机构：南方医科大学第二临床学院 解放军总医院第六医学中心中心实验室 解放军总医院第六医学中心耳鼻咽喉头颈外科医学部研究所 华南理工大学医学院 

出 版 物：《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期：2024年第48卷第8期

页      面：601-607页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：北京市自然科学基金项目(7242135) 国家自然科学基金项目(82202382) 

主　　题：创伤弧菌 白藜芦醇 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 胱天蛋白酶3 沉默调节蛋白1 细胞凋亡 巨噬细胞 

摘      要：目的 在创伤弧菌感染体内外模型探究沉默调节蛋白1(Sirt1)对巨噬细胞凋亡的调控作用及其分子机制。方法 通过遗传霉素G418筛选构建Sirt1稳定过表达的小鼠RAW264.7巨噬细胞；采用CCK-8法检测Sirt1过表达在创伤弧菌细胞溶素（VVC）对RAW264.7细胞损伤效应中的调控作用；Western印迹法检测VVC处理RAW264.7细胞中Sirt1过表达及Sirt1激活剂白藜芦醇（RSV）预处理对凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）、裂解型-PARP(cleaved-PARP)、胱天蛋白酶3(caspase3)、裂解型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase3)表达的影响；建立小鼠创伤弧菌脓毒症模型并腹腔注射RSV,12 h后取各组小鼠肺、脾、肝组织，采用免疫组织化学法检测凋亡蛋白cleaved-caspase3的表达，同时收集小鼠腹腔巨噬细胞并用Western印迹法检测凋亡通路蛋白PARP、cleavedPARP、caspase3、cleaved-caspase3及乙酰化p53蛋白的表达变化。结果 过表达Sirt1能够降低VVC诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞损伤；过表达Sirt1及RSV预处理可降低VVC刺激下RAW264.7细胞中凋亡相关蛋白的表达；在小鼠创伤弧菌脓毒症模型中，RSV预防性给药能降低肺、脾、肝等组织中凋亡标志物cleaved-caspase3的表达，同时降低小鼠腹腔巨噬细胞中凋亡相关蛋白cleaved-PARP、cleaved-caspase3及乙酰化p53的表达。结论 Sirt1能抑制p53的乙酰化并减少小鼠巨噬细胞的凋亡，在创伤弧菌脓毒症中起保护作用。