口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC在大肠杆菌中的高效表达

作     者：曹轶梅 刘在新 卢曾军 郭建宏 常惠芸 谢庆阁 

作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所农业部病毒学重点实验室甘肃兰州730046 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2004年第35卷第1期

页      面：115-118页

核心收录：

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家973课题(G19990119011) 甘肃省科技攻关项目(GS993-A41-025) 中国农业科学院院长基金(0028-16) 社会公益基金 "十五"国家科技攻关(2002BA514A-18-1) 

主　　题：口蹄疫 病毒 非结构蛋白基因 3ABC 大肠杆菌 基因表达 

摘      要：将牛源O型口蹄疫病毒(Foot and mouthdiseasevirus,FMDV)China/99株非结构蛋白基因3ABC从pGEM T 3ABC重组质粒中亚克隆到原核表达载体pTriEx 4Neo上,成功构建重组表达质粒pTriEx 3ABC。将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中表达,表达产物经SDS PAGE可检测到分子量约为59 1ku的目的蛋白带,经薄层扫描分析,目的蛋白占菌体总蛋白的31 4%。Westernblotting分析证明表达产物能被FMDV阳性血清所识别。表达产物纯化后作抗原进行ELISA检测,结果表明,表达的蛋白显示特异的免疫学活性,并能区分自然感染动物和注苗动物。研究为以FMDV非结构蛋白为抗原,建立自然感染动物和注苗动物的鉴别诊断方法提供了材料。