花粉管细胞壁原子力显微镜观测制样方法优化
Optimization of Preparation and Detection Methods for Pollen Tube Cell Wall by Atomic Force Microscopy作者机构:北京大学生命科学学院 北京大学现代农学院 云南大学生态与环境学院
出 版 物:《植物学报》 (Chinese Bulletin of Botany)
年 卷 期:2024年第59卷第5期
页 面:783-791页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 071001[理学-植物学] 07[理学]
基 金:国家自然科学基金(No.32060175,No.32060043) 云南省基础研究计划重点项目(No.202201AS070014)
摘 要:原子力显微技术是研究植物细胞壁超微结构与力学性质的重要表征手段,良好的样品制备是获得可靠数据的前提。花粉管作为微米级别的植物样品,是研究细胞壁结构与功能的典型实验材料,但是制样过程中活性生理状态下的花粉管与基底黏附不牢固,难以获得活性生理状态下的花粉管原子力显微镜观测数据。该文以烟草(Nicotiana tabacum)花粉管为材料,对花粉管原子力显微样品制备和观测方法进行优化,采用固体培养基薄层作为花粉管与基底之间的黏附剂,花粉管在萌发和生长的同时完成与基底的黏附。与常规的干燥-复水法相比,优化的液下黏附法,可在液体环境下直接观测,无需经过干燥处理,避免了干燥-复水过程对花粉管造成的形貌皱缩与力学性质改变,能够获得活性生理状态下花粉管细胞壁原位的高分辨率原子力显微镜观测数据。该方法可应用于不同种属及不同尺寸花粉管的原子力显微镜观测。