绿原酸干预鸭肠炎病毒感染鸭胚成纤维细胞的代谢组学分析

作     者：杨芸芸 张黔东 冯轶 文安林 杨颖 文明 刘江 

作者机构：贵州大学动物科学学院 惠水县濛江街道农业农村综合服务中心 贵州大学动物疫病研究所 毕节市农业农村局 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(32360872和315060703) 贵州省百层次创新型人才项目(黔科合平台人才6009号) 贵州省科技平台项目[黔科合平台人才5253号] 

主　　题：鸭肠炎病毒 绿原酸 鸭胚成纤维细胞 代谢组学分析 代谢通路 

摘      要：为探究绿原酸对鸭肠炎病毒（DEV）感染鸭胚成纤维细胞（DEF）代谢组的影响，本研究选取11日龄SPF鸭胚制备DEF，通过CCK-8法筛选绿原酸作用浓度，结果显示绿原酸最佳作用浓度为0.250 mg/mL。将DEF分别设置空白对照组（DEF按常规方法培养24 h、36 h和48 h）、绿原酸对照组（用0.250 mg/mL绿原酸溶液作用DEF 1 h吸出，润洗后加入培养基继续培养24 h、36 h和48 h）、DEV感染组(加入DEV病毒液作用DEF 1 h吸出，润洗后加入培养基继续培养24 h、36 h和48 h）和绿原酸干预组（用0.25 mg/mL绿原酸溶液作用DEF 1 h吸出，润洗后接种DEV病毒液1 h，再润洗后加入培养基继续培养24 h、36 h和48 h），收集各组处理24 h、36 h和48 h时细胞样品，采用液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）测定差异代谢物，MetaX软件筛选差异代谢物，KEGG分析差异代谢物富集信号通路，同时采用荧光定量RT-PCR检测DEV增殖情况。结果显示：与细胞对照相比，绿原酸对照组在3个时间点的细胞活性差异不显著（P0.05）,DEV感染组细胞活性下降极显著（P0.01），绿原酸干预组在24 h和36 h时细胞活性下降显著（P0.05），至48 h时下降极显著（P0.01）；与DEV感染组相比较，绿原酸干预组在3个时间点的差异代谢物分别有28、31和21个，差异代谢物主要是六亚甲基双乙酰胺、S-乳酰谷胱甘肽、L-谷氨酸，L-蛋氨酸、吲哚-3-乙酸、甲酰基-L-蛋酰肽等，富集的信号通路主要有半胱氨酸与蛋氨酸代谢、酪氨酸代谢、苯丙氨酸代谢、色氨酸代谢等代谢通路，DEVNP基因拷贝数下降显著（P0.05）。上述结果表明，绿原酸通过改变DEF细胞半胱氨酸和蛋氨酸等氨基酸代谢抑制DEV增殖，本研究为绿原酸在鸭病毒性肠炎等病毒性疾病的防治提供科学依据。