姜黄素通过影响线粒体跨膜电位和TLR4/NF-κB 信号通路减轻LPS诱导急性肺损伤

作     者：赵浩 黄江 陈圣东 陈修瑞 张婉婷 章卓 

作者机构：西南医科大学附属中医医院药剂科 西南医科大学药学院 

出 版 物：《中药药理与临床》 (Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：2023年度四川省中医药管理局中医药科研专项课题面上项目(编号:2023577) 泸州市科技局项目(编号:2018LZXNYD-ZK46) 

主　　题：姜黄素 急性肺损伤 线粒体跨膜电位 Toll样受体4 核因子-κB 凋亡 

摘      要：目的：观察姜黄素是否通过影响线粒体跨膜电位和TLR4/NF-κB信号通路抑制脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）。方法：将RAW264.7细胞分为空白对照组、模型对照组、姜黄素5、10、20 μmol/L组、地塞米松10 μmol/L组，采用10 ng/mL LPS刺激细胞，CCK-8法检测姜黄素对RAW264.7细胞活性的影响；Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率；JC-1染色检测线粒体跨膜电位；Western blot 检测Toll样受体4（TLR4）、核转录因子κB（NF-κB）、Bcl-2、Bax表达；ELISA法检测上清液中促进肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)、IL-6和IL-10含量。动物实验将昆明种小鼠72只分为假手术对照组、模型对照组、姜黄素50、100、200 mg/kg组、地塞米松 10 mg/kg组，采用50 mg/mL LPS气管滴注造ALI模型，其中36只小鼠用于检测肺湿/干比，HE染色检测肺病理变化，Western blot 检测肺TLR4， NF-κB 表达，剩余36只小鼠通过ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β 和IL-10含量。结果：与正常对照组比较，模型对照组LPS诱导的RAW264.7细胞存活率显著下降(P0.01)、凋亡率显著增高(P0.01)，Bcl-2蛋白表达下调，Bax蛋白表达上调，Bax/Bcl-2比值升高(P0.01)，LPS诱导的RAW264.7细胞线粒体跨膜电位明显降低(P0.01)，RAW264.7细胞TLR4/NF-κB蛋白表达显著上调(P0.01)，RAW264.7细胞TNF-α，IL-6，IL-1β表达显著增加(P0.01)，IL-10表达明显下降(P0.01)；与模型对照组比较，姜黄素能显著提高RAW264.7细胞存活率(P0.05)，抑制LPS诱导的RAW264.7细胞凋亡(P0.01)，降低Bax/Bcl-2比值(P0.05)，提高LPS诱导的RAW264.7细胞线粒体跨膜电位(P0.05)，抑制RAW264.7细胞TLR4/NF-κB蛋白表达(P0.05)，抑制RAW264.7细胞TNF-α，IL-6，IL-1β分泌(P0.01)，增加IL-10表达(P0.05)。与假手术对照组比较，LPS诱导的小鼠肺病理损害和肺湿/干质量比显著增加(P0.01)，小鼠肺TLR4/NF-κB蛋白表达显著上调(P0.01)，小鼠肺TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著增加(P0.01)，IL-10含量明显降低(P0.01)；与模型对照组比较，姜黄素各组能减轻小鼠LPS诱导的肺病理损害和肺湿/干比(P0.01)，抑制小鼠肺TLR4/NF-κB蛋白表达(P0.01)，抑制小鼠肺TNF-α，IL-6，IL-1β分泌(P0.01)，增加IL-10释放(P0.05)。结论：姜黄素减轻LPS诱导的ALI可能是通过提高线粒体跨膜电位、抑制TLR4/NF-κB信号通路最终抑制凋亡而发挥作用。