黄精多糖的分离纯化及其免疫调节活性研究

作     者：孙芸芸 赵明 秦诗越 郑斯纯 张皓翔 马晓丹 李肖梁 徐伟 

作者机构：浙江大学动物科学学院 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：浙江省“尖兵”“领雁”研发攻关计划(2022C02031) 国家自然科学基金(32273044) 浙江省自然科学基金(LY21C180003)项目资助 

主　　题：黄精 多糖 分离纯化 巨噬细胞 免疫调节 信号通路 

摘      要：目的：分离纯化长梗黄精多糖，表征其初级结构，研究其对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节活性。方法：采用超声辅助法从长梗黄精根茎中提取粗多糖，利用木瓜蛋白酶联合Sevag法除蛋白后获得黄精多糖（Polygonatum filipes polysaccharides， CSPFPs），苯酚-硫酸法测定总糖含量；采用傅里叶变换红外光谱（FT-IR）、高效凝胶渗透色谱（HPGPC）、高效液相色谱（HPLC）等方法对黄精多糖进行结构分析；采用MTT、中性红、ELISA和Western blot等试验技术分别研究黄精多糖对巨噬细胞的细胞毒性、胞饮活性、TNF-α分泌、MAPK和NF-κB信号转导通路的影响。结果：超声辅助提取法的CSPFPs得率为41.61%，总糖含量为94.00%，Mw为3125 Da，由阿拉伯糖（1.85%）、半乳糖（6.14%）、葡萄糖（56.41%）和甘露糖（35.60%）组成；体外试验表明，黄精多糖在2.5～200 μg/mL对巨噬细胞无细胞毒性，可显著增强巨噬细胞的胞饮活性，促进TNF-α的产生，提高p38、ERK、JNK、p65、IκB和IKK等蛋白的磷酸化水平，激活MAPK和NF-κB信号通路。结论：超声辅助法可以高效提取具有免疫调节活性的长梗黄精多糖，为黄精多糖作为免疫增强剂的开发应用提供基础数据。